www.biotechugamg.fora.pl

Robert

- pytanie o sds page wg laemmi (czyli to co robiliśmy) - jak się robi, po co te dwie fazy żelu, po co sds... co tam jeszcze znajdziecie Razz

- wykrywanie białek w żelu PA - jakie metody i jaka różnica między nimi

- jakie metody wykrywania białek na błonach po blotach

- jaka jest różnica między białkiem po westernie a takim po izolacji metodą powinowactwa (tam chodziło o bycie zdenaturowanym)

- obliczenia: policzyć liczbę mmoli i umoli z różnych roztworów: był podany %(w/w) i gęstość np.

n3l

Zad obliczeniowe
1) oblicz ile trzeba pobrac roztworu 37% HCl o gestosci d=1,19g/cm3
zeby zrobic 200ml 25% roztworu (wagowo/objętosciowego) co oznacza ze
25g znajduje się w 100ml roztworu wiec w 200 -> 50g i liczymy dalej
odp: 113ml
2)podaj ile to mikromoli i milimoli Na2CO3 M=106g/mol
a)w 10ml 0,0012 % roztworu
b) nie pamietam, ale podobne tylko inne cyfry
c) nie pamietam, ale podobne

Zad opisowe
1) jakie wlasciwosci biochemiczne lizozymu wykorzystujemy w:
a) chromatografii jonowymiennej, podaj przyklad innego kationitu dla lizozymu niz CMC
b) saczeniu molekularnym i co to jest v0
c) reakcji z M. lysodeikticus, co to izoenzym
2) Opisz elektroforeze nieciagła wg Laemmi dla SDS PAGE
3) Jakie znasz metody wywolywania bialek w zelu
4) jakie medody wykrywania bialek po blotach i porownaj czym sie roznia
5)roznica pomiedzy bialkiem GST po westerni i SDS PAGE a GST oczyszczanym na zlozu agarozowym
6) opisz metode delikatnego szoku osmotycznego do izolacji bialek periplazmatycznych w warunkach tris, EDTA, sacharoza i woda

wiecej w tej chwili nie moge se przypomniec, ale jeszcze dopisze jak mnie oswieci

n3l

rada cioci oli jeszcze - nie wiem jak w innych grupach to bedzie, ale w mojej grupie nie trzeba bylo sie w ogole uczyc do kolokwium z tych materialow dodatkowych tylko ze skryptu i sprawozdan plus ta wiedza ktora juz macie wryta przez 4 lata w glowe o tych technikach.

ogolnie pytania na prawde proste i nic zaskakujacego(ani spoza materialu na cw) - kazdy pewnie dostalby 5 z tego kola gdyby przedluzyla nam czas o 15 min - 1 godzina to bylo zdecydowanie za malo czasu na ta ilosc zadan pisemnych -> to gowno mialo chyba z 5 albo 6 stron razem...

Gosia

jakie znamy tagi, co to jest białko fuzyjne i jak zrobić białko fuzyjne i jak odciąć tego taga później.

Wojtek

Pytania z naszej grupy:
1. Po zrobieniu Westernu nie otrzymujemy prążka na membranie. Podaj najczęstsze problemy i zaproponuj ich rozwiązania.
2. Napisz po co dodajemy SDSu, gliceryny, B-merkaptoetanolu i jakiegoś barwnika. Których z nich nie używamy podczas e. natywnej?
3. Czy do oczyszczenia fosfatazy alkalicznej (podany był jej punkt izoelektryczny) można użyć ch. jonowymiennej? Jeśli nie, to zaproponuj inną metodę jej oczyszczenia.
4. Zadanko obliczeniowe, mniej więcej coś takiego: od 100ml x molowego roztowru KOH odjęto 20ml, dosypano x gram czystego KOH i dopełniono do 100ml. Oblicz stężenie molowe.
5. Jak konstruuje się białka fuzyjne, metody oczyszczania i oddzielania tagu od produktu.
6. Elektroforeza nieciągła wg. Laemmi (oprócz dwóch rodzajów żeli chodziło tutaj również o różne bufory i co się dzieje w tych żelach)
7. Jak powstają izoenzymy alkalicznej fosfatazy i co to są izoenzymy
8. Czym się różni rozdział białek w ch. jonowymiennej i sączeniu molekularnym.
9 zadania niestety nie pamiętam

Gosia

w pytaniu o lizozym z micrococcusem ktoś z mojej grupy (jakaś nieliczna osoba) napisał zajebiaszcze wytłumaczenie dlaczego użyliśmy akurat tych a nie innych bakterii, czy ktoś może domyśla się że to jego odpowiedz była ową zajebiaszczą która urzekła naszą panią prowadzącą?
Napiszcie co kto napisał, proszę. dziękuję

Aś

jej, ja już nie pamiętam. tylko to ze skryptu chyba. albo ze sprawka jakiegoś. Na pewno nic więcej niż
Bakterie Gram(+) Micrococcus lysodeikticus są szczególnie wrażliwe na działanie lizozymu, który powoduje hydrolizę polisacharydu prowadząc do lizy komórek bakteryjnych.
bo tylko tyle w sprawku znalazłam.

Robert

ja napisałem to co Asia, ale bez tego, że G+ i pewnie całej nazwy też nie pamiętałem

Cień

no ja podobnie, ze spadek OD bakterii po inkubacji w porownaniu z wyjsciowym jest proporcjonalny do zawartosci lizozymy, bo bakterie lizuja, ale nie pamietam juz czy napisalam o krzywej wzorcowej.
dzikosc z tym przedmiotem, a tak mi sie wydawalo ze lee latwe piatki beda... :/
ale trzymam kciuki za Gosie, jak chcesz, to Ci moge moje notatki przyniesc, Jola np komentowala ze nie przeczytalismy materialow - ja czesc przejzalam i wypisalam z nich cos, wazne np zeby przeczytac wstep do publikacji w ktorych bylo wyjasnienie jak dziala szok osmotyczny - to chyba przy tym babka przyleciala do Dawida marudzic ze nikt nie przeczytal i tak wjezdzala ze tylko sie modlilam, zeby to nie moja praca byla xD